银杏叶提取物药典技术规范分享

互推小编 2023-04-25

银杏叶提取物 GINKGO LEAVES EXTRACT 本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶经加工制成的提取物。【制法】取银杏叶，粉碎，用稀乙醇加热回流提取，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，加在已处理好的大孔吸附树脂柱上，依次用水及不同浓度的乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥；或回收乙醇，浓缩成稠膏，真空干燥，粉碎，即得。【性状】本品为浅棕黄色至棕褐色的粉末；味微苦。【鉴别】（1）取本品0.2g，加正丁醇15ml，置水浴中温浸15分钟并时时振摇，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取银杏叶对照提取物0.2g，同法制成对照提取物溶液，照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：3：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铝乙醇溶液，在紫外光（365mn）下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（2）取本品，照〔含量测定〕萜类内酯项下的方法试验，供试品色谱中应呈现与银杏叶总内酯对照提取物色谱峰保留时间相对应的色谱峰。【检查】水分不得过5.0%（通则0832第二法）炽灼残渣不得过0.8%（通则0841）。重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（通则0821），不得过20mg/kg。黄酮苷元峰面积比按〔含量测定〕项下的总黄酮醇苷色谱计算，槲皮素与山柰素的峰面积比应为0.8～1.2，异鼠李素与槲皮素的峰面积比值应大于0.15。总银杏酸照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为150mm，柱内径为4.6mm，粒径为5μm）；以含0.1%三氟乙酸的乙腈为流动相A，含0.1%三氯乙酸的水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为310nm。理论板数按白果新酸峰计算应不低于4000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%） 0～30 75→90 25→10 30～35 90 10 35～36 90→75 10→25 36～45 75 25 对照品溶液的制备取白果新酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1μg的溶液，作为对照品溶液；另取总银杏酸对照品适量，用甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为定位用对照溶液。供试品溶液的制备取本品粉末约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，称定重量，超声使其溶解，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法精密吸取供试品溶液、对照品溶液及定位用对照溶液各50μl，注入液相色谱仪，计算供试品溶液中与总银杏酸对照品相应色谱峰的总峰面积，以白果新酸对照品外标法计算总银杏酸含量，即得。本品含总银杏酸不得过10mg/kg。【含量测定】总黄酮醇苷照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备取槲皮素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品约35mg，精密称定，加甲醇-25%盐酸溶液（4：1）的混合溶液25ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，以槲皮素对照品的峰面积为对照，分别按下表相对应的校正因子计算槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量，用待测成分色谱峰与槲皮素色谱峰的相对保留时间确定槲皮素、山柰素和异鼠李素的峰位，其相对保留时间应在规定值的±5%范围之内（若相对保留时间偏离超过5%，则应以相应的被替代对照品确证为准），即得。相对保留时间及校正因子（F）见下表：待测成分（峰）相对保留时间校正因子（F）槲皮素 1.00 1.0000 山柰素 1.77 1.0020 异鼠李素 2.00 1.0890 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山柰素含量+异鼠李素含量）×2.51 本品按干燥品计，含总黄酮醇苷不得少于24.0%。萜类内酯照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丙醇-四氢呋喃-水（1：15：84）为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500。对照提取物溶液的制备取银杏叶总内酯对照提取物适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含2.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品约0.15g，精密称定，加水10ml，置水浴中温热使溶散，加2%盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次（15ml、10ml、10ml、10ml），合并提取液，用5%醋酸钠溶液20ml洗涤，分取醋酸钠液，再用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯提取液及洗涤液，用水洗涤2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照提取物溶液5μl、10μl，供试品溶液5～l0μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量，即得。本品按干燥品计算，含萜类内酯以白果内酯（C15H18O8）、银杏内酯A（C20H24O9）、银杏内酯B（C20H24O9）和银杏内酯C（C20H24O10）的总量计，不得少于6.0%。【贮藏】遮光，密封。【制剂】银杏叶制剂