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昆明纳瑞丨蛋白质印迹技术（Western Blot）的基本流程和步骤

互推小编
 

蛋白质印迹技术（免疫印迹实验）又称为Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。Western Blot主要用于检测或分析蛋白，应用领域集中在基因表达研究、抗体活性检测和疾病诊断等。

01 蛋白质印迹基本流程图


02 western blot步骤


蛋白转印使用天能VE-586转移电泳槽主要优势在于:它可以在不埋冰的情况完成的蛋白电泳，如果配合快速转膜液，整个电泳过程只需不到30分钟，可同时转印4块胶，操作方法也比较简便。在缩短转印时间的同时，实现了蛋白样品的高效转印。

03 蛋白电泳
目前常用的是SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳），蛋白质会根据分子量大小分开，分子量的蛋白会留在胶的下部，分子量大的会在胶的顶部。


04 转膜
转膜主要是将蛋白质从凝胶转移到膜上，常用的是NC膜和PVDF（聚偏氟乙烯），由于膜与蛋白质高度亲和的能力，所以更容易与蛋白结合。为了便于观察电泳效果和转膜效果，可以使用蛋白预染Marker，以方便判断蛋白分子量大小。

昆明纳瑞科技提供天能VE-586以及相应的配件等

昆明纳瑞科技提供转膜过程需要的多种产品，详情如下：

同时转印四块凝胶

时间节约一半

效率大大提高

最关键的是安全

性能特点

  • 可同时转印四块9×9cm凝胶
  • 转印时间为15-60min
  • 槽体高强度，免除液体渗漏的困扰
  • 专用开启式转移胶架，操作方便
  • 多重安全设计，解决操作安全问题

06 ECL化学发光反应：
在工作台上铺一张保鲜膜，将PVDF膜置于保鲜膜上。将ECL的A和B两种试剂在EP管内等体积混合（注意吸完A试剂后吸B试剂前要更换枪头），然后均匀滴在PVDF膜的蛋白面，反应1~2min后，将PVDF膜上多余的ECL发光液吸干，进行固定。


07凝胶图象分析
将胶片进行扫描或拍照，使用凝胶成像仪进行成像分析。

对于转膜有很多的方法，常见的有干转和湿转。

但是转印的时间都是很久的，而且一次性转印的数量也是有限的，多则4小时，少则两小时，现在有一个神奇的设备可以快速高效的完成Western Blot的蛋白转膜。

那么如何解决这个难题：

天能VE-586

同时转印四块凝胶

时间节约一半

效率大大提高

最关键的是安全

性能特点

  • 可同时转印四块9×9cm凝胶
  • 转印时间为15-60min
  • 槽体高强度，免除液体渗漏的困扰
  • 专用开启式转移胶架，操作方便
  • 多重安全设计，解决操作安全问题

昆明纳瑞科技有限公司

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